Vad betyder antikroppar??

i Sjukdomar i immunsystemet 02/24/2019 0 182 Visningar

Antikroppar är proteiner som finns i kroppsvätskor och används av immunsystemet som ett medel för detektion och respons. Antikroppar produceras i plasmaceller, som är en typ av vita blodkroppar och är en integrerad del av kroppens naturliga försvarssystem. Hos däggdjur finns det fem huvudtyper av antikroppar, som var och en har liknande grundläggande strukturer. Men tips på proteiner kan vara otroligt olika, och det är denna del som interagerar med själva föroreningen, vilket gör att miljoner unika antikroppar kan existera..
Vanligtvis tjänar dessa proteiner som en slags snabbmärkningsenhet, som sedan varnar andra försvarsceller för en attack på allt de markerar. De gör detta genom att binda till en invasiv bit känd som ett antigen. Varje antigen har en del som har en mycket specifik form, känd som en epitop. Varje antikropp kan motsvara endast en epitop, tack vare dess spets av en specifik form, som är ett slags lås och nyckel. När denna anslutning, känd som inducerad passform, har inträffat, blir antigenet omedelbart igenkänt för försvarceller som en fiende.

Efter att antigen har märkts med antikroppar, attackeras de vanligtvis av andra celler. Dessa inkluderar celler, såsom mördande celler, som kan följa infekterade celler, till exempel celler som har äventyrats av viruset. Denna kombination av antikroppar och mördare-T-cellinsatser gör att kroppen snabbt kan reagera på ett brett spektrum av antigener, vilket hjälper till att skydda kroppen från infektioner..

En annan typ av respondercell, känd som en B-cell, innehåller faktiskt antikroppar som hjälper den i det dagliga arbetet. På grund av dess komponent kan en B-cell omedelbart detektera ett antigen genom att binda till det. Sedan absorberar den både antigenet och antikroppen och bearbetar dem till peptider som lockar hjälpar-T-cellen, vilket utlöser reaktionen i B-cellen. Denna reaktion får B-cellen att delas upp och delas, vilket skapar miljoner kopior av antigenet specifikt inriktat på proteinet den har absorberat, vilket skapar en armé av fokuserade försvarsceller.

Antikroppar kan också interagera direkt med patogener för att stoppa spridningen av vissa virus och sjukdomar och inte bara märka dem. De gör detta genom att inte bara kontakta någon punkt på antigenet, utan också den punkt där den ansluter till andra celler för att infektera dem. Således neutraliserar proteinet effektivt hotet om spridningen av viruset genom systemet, vilket gör det mycket lättare att ta hand om det..

Det finns fem huvudklasser av antikroppar som finns hos däggdjur: IgA, IgD, IgE, IgG och IgM. Det finns två typer av IgA-antikroppar, och de finns främst i områden med slemhinnor, såsom luftvägarna och tarmen, liksom i bröstmjölk, saliv och tårar. IgD detekteras vanligtvis som en receptor på B-celler innan de riktar sig mot ett specifikt antigen, medan IgM detekteras på B-celler och verkar på patogener. IgE är en klass antikroppar som attackerar allergener och orsakar ett histaminrespons. IgG har fyra huvudtyper och ansvarar för de flesta av immunresponsen mot invasiva patogener..

Blodtest för antikroppar

Antikroppstest

Människokroppen är ett av de mest komplexa systemen, där allt är sammankopplat och komplementärt. Det mest fantastiska i människokroppen är att han själv kan hantera ett antal sjukdomar.

Cirkulationssystemet kan berätta om alla processer som sker i kroppen. Antikroppar i blodet produceras när främmande ämnen som virus, bakterier eller allergener förekommer..

I mänskligt blod finns det mer än en miljon olika antikroppar, de förekommer mycket tidigare än patogener. Antikroppar bildas genom att kombinera en mängd olika blodkroppar och lymfocyter..

De skyddar kroppen. Om patogener upptäcks börjar en viss typ av antikropp produceras omedelbart, vilket direkt kommer att bekämpa denna typ av infektion..

Antikroppsklassificering

Forskare har upptäckt och studerat vissa antikroppar, för enkelhets skull utses de av vissa markeringar. Varje grupp är relaterad till vissa antigener:

  1. IgM-gruppen - antikroppar som snabbt svarar på infektioner i kroppen, de är de första som bygger en skyddsbarriär. Ett stort antal antikroppar från denna grupp i blodet indikerar sjukdomens början.
  2. IgA-grupp - antikroppar som också reagerar snabbt på sjukdomar, men främst på kroppens slemhinnor. En hög mängd av sådana antikroppar i blodet kan indikera närvaron av akuta luftvägssjukdomar, hud- och leversjukdomar.
  3. IgE-grupp - dessa molekyler är känsliga för närvaron av bakterier och svampar. Den viktigaste gruppen av antikroppar för gravida kvinnor, de är ansvariga för utvecklingen av stark immunitet i det framtida barnet.
  4. IgG-gruppen ansvarar för utvecklingen av ihållande immunitet och skydd mot toxiska effekter..
  5. IgD-grupp - närvarande i blodet i en liten mängd, ännu inte helt förstått.

Analysen hjälper till att bestämma spridningen av sjukdomen - en svamp-, virus- eller bakterieinfektion. Med antalet antikroppar av ett eller annat slag är det möjligt att bestämma sjukdomsförloppet, i vilket skede den är och hur kroppen kämpar mot den.

Indikationer för att donera blod för antikroppar

En liknande typ av analys föreskrivs för att bestämma immunitetstillståndet, med systematiska sjukdomar och även under ett antal förhållanden.

Vem tilldelas en liknande analys:

  • Patienten diagnostiseras systematiskt med infektioner;
  • Patienter med onkologi, allergier och med autoimmun sjukdom;
  • Som förberedelse för operation;
  • Innan en organtransplantationsoperation;
  • Under perioden för rehabilitering av kroppen efter allvarlig sjukdom;
  • Under graviditet;
  • För att bestämma den exakta doseringen av immunglobulin.

Denna typ av studie föreskrivs också om det finns misstankar om en sjukdom med mässling, röda hundar, hepatit. Analysen används vid de första symptomen på infektion med vattkoppor, helminths, giardia, polio, herpes, skrump, onkologi, HIV-infektion.

Vid kronisk infertilitet föreskrivs test för detektion av antikroppar mot spermier och hCG.

Behovet av denna undersökning är förståeligt, efter att ha fått resultaten kan läkaren ställa en diagnos, förskriva behandling och justera dosen av det ordinerade läkemedlet. Analysdata kommer också att hjälpa till att spåra utvecklingen av sjukdomen eller stoppa den i början.

Antikroppsberedning

Om läkaren insisterar på att donera blod för antikroppar, är detta viktigt, och denna undersökning kan inte ignoreras. För att få ett tillförlitligt resultat måste du följa ett antal regler:

  • Blod tas på morgonen på tom mage (all konsumtion av mat, vatten och tobak är utesluten);
  • Några dagar innan detta måste du hålla fast vid en viss diet. Allt skarpt, fett och salt bör uteslutas från kosten. Minimerad alkohol- och kaffekonsumtion.
  • Undvik fysisk aktivitet och fysioterapikurser per dag.
  • Donera inte blod för antikroppar om patienten tar medicin eller just har avslutat en läkemedelsbehandling.

Graviditet och antikroppar

Under graviditet är blodprover för antikroppar av stor betydelse, särskilt om rhesusfaktorn hos föräldrar är annorlunda. Det är särskilt viktigt att spåra antikroppar om en gravid kvinna har ett Rhesus-negativt blodantal och en positiv far till en framtida baby.

I sådana situationer förvärvar ofta barnet farens Rh-faktor, och kvinnans kropp reagerar på detta med snabb bildning av antikroppar, vilket kan leda till fosteravstötning.

Det finns en Rhesus-konflikt, eftersom moderns kropp tar bildandet och utvecklingen av fostret som en främmande organism och börjar slåss mot det.

Upprepad graviditet är den farligaste, eftersom kvinnans kropp under den första graviditeten har utvecklat ett stort antal antikroppar och de börjar slåss i full kraft..

Analysen för antikroppar visar deras storlek, och läkaren bestämmer hur mycket immunglobulin som ska förskrivas för att förstöra dem..

Röda hund

Rubella är en mycket farlig sjukdom för ett gravid och ofött barn. Detta är en infektionssjukdom som provocerar utvecklingen av foster missbildningar, felaktig bildning av dess organ. Förutom rubella i de tidiga stadierna av graviditeten doneras nödvändigtvis blod för facklainfektioner.

Om resultatet är positivt övervägs tester som kan visa att en kvinna har haft denna sjukdom och att hon har utvecklat tillräckligt med antikroppar för att bekämpa re-sjukdomen.

Resultaten kan visa att kvinnan har varit sjuk under en tid, med ett sådant resultat får hon en abort, annars är risken för medfödda avvikelser hos fostret mycket hög.

Herpes

En viktig studie under graviditeten är ett antikroppstest för herpes. Herpes själv kan leva i en vuxen kropp utan att orsaka några problem.

Under graviditeten kan detta virus ha en irreparabel effekt på det ofödda barns hälsa. Det orsakar missbildningar av fosterorganen och leder till och med till missfall.

Giardia

Upptäckten av giardia genom ett blodprov ger inte en korrekt bild, eftersom resultatet kommer att förbli positivt under lång tid efter behandlingen. Den viktigaste typen av analys är fortfarande leverans av avföring för giardiasis.

inälvsmaskar

Helminthägg är svåra att upptäcka med den traditionella metoden - avföring av avföring. Anthelmintiska antikroppar ger det mest exakta testresultatet, det är bäst att göra en analys flera gånger. Om resultatet var negativt vid den första leveransen, upprepa proceduren efter två veckor.

Hepatit C

Ett positivt resultat av de upptäckta IgG-antikropparna antyder att patienten har hepatit, har förvärvat en kronisk form eller varit i kontakt med en infekterad person.

Ett positivt resultat av IgM-antikroppar indikerar att sjukdomen är i ett aktivt stadium. Med en snabb identifiering av patogener kan du noggrant ställa en diagnos och förskriva en effektiv behandling som förhindrar utvecklingen av sjukdomen.

Syfilis

Tidig diagnos av syfilis i kroppen låter dig förskriva en effektiv behandling. För att upptäcka syfilis används metoden för att detektera flera antikroppar, denna metod är alltid korrekt.

IgG- och IgM-antikroppar detekteras, närvaron av den första indikerar en kronisk form av sjukdomen, närvaron av den andra indikerar en akut form.

Tuberkulos

Det första tuberkulostestet är en röntgen. Tyvärr upptäcker det inte alltid sjukdomen. Det finns också typer av tuberkulos som utvecklas utanför lungorna..

Sådana former hjälper till att upptäcka IgM- och IgG-antikroppar. Den välkända Mantoux-reaktionen innehåller en uppsättning av dessa antikroppar och hjälper till att identifiera sjukdomen effektivt och på kort tid..

Produktion

En analys av antikroppar i blodet hjälper till att identifiera ett stort antal sjukdomar, både i det inledande skedet och i en kronisk form. Denna metod låter dig klargöra diagnosen som läkaren ställer när du bestämmer infektionssorten eller för en helhetsbild av immunsystemets tillstånd och föreskriver lämplig behandling.

En sådan studie är särskilt viktig för gravida kvinnor, eftersom en snabb upptäckt av sjukdomar kommer att hjälpa till att förhindra fostrets missbildningar och upprätthålla graviditeten.

Det är bäst om blodantikroppstest görs under graviditetsplanering, då kommer det att vara möjligt att genomföra fullständig behandling och risken för komplikationer under denna period minskar avsevärt.

Ett blodprov för antikroppar finns i många laboratorier, när du väljer en plats bör du vara uppmärksam på listan över möjliga studier. Ju större den är, desto fler möjligheter har laboratoriet och desto mer exakta blir resultaten.

Priset på analyser i olika laboratorier kommer att skilja sig något, eftersom förbrukningsvarorna för studierna är desamma.

Avkodningen av undersökningsresultaten tillhandahålls bäst för läkaren, eftersom olika faktorer beaktas - ålder, kön, patientens tillstånd.

ANTIKROPPAR

Antikroppar är proteiner från globulinfraktionen av humant blodserum och varmblodiga djur som bildas som svar på införandet av olika antigener (bakterier, virus, proteintoxiner, etc.) i kroppen och interagerar specifikt med antigenen som orsakade deras bildning. Genom att binda till de aktiva ställena (centra) med bakterier eller virus, förhindrar antikroppar deras reproduktion eller neutraliserar de giftiga ämnena som frisätts av dem. Närvaron av antikroppar i blodet indikerar att kroppen interagerade med antigenet mot den sjukdom den orsakar. I vilken utsträckning immunitet beror på antikroppar och i vilken utsträckning antikroppar endast åtföljer immunitet bestäms i relation till en specifik sjukdom. Bestämning av antikropparnivån i blodserum gör det möjligt att bedöma immunitetens intensitet även i de fall när antikroppar inte spelar en avgörande skyddande roll.

Den skyddande effekten av antikroppar som finns i immunserum används ofta vid behandling och förebyggande av infektionssjukdomar (se Seroprofylax, seroterapi). Antikroppsreaktioner med antigener (serologiska reaktioner) används för diagnos av olika sjukdomar (se serologiska studier).

Innehåll

Historia

Under en lång tid om kemikalien. naturen av A. visste väldigt lite. Det är känt att antikroppar efter antigenadministration finns i blodserum, lymf, vävnadsextrakt och att de specifikt reagerar med deras antigen. Närvaron av antikroppar bedömdes på grundval av de synliga aggregaten som bildas vid interaktion med antigenet (agglutination, utfällning) eller genom en förändring av antigenets egenskaper (toxinneutralisering, celllys), men nästan ingenting var känt till vilket kemiskt substrat av antikropparna.

Tack vare användningen av metoder för ultracentrifugering, immunelektrofores och rörlighet av proteiner i ett isoelektriskt fält har tillhörande av antikroppar till klassen gamma-globuliner eller immunoglobuliner bevisats.

Antikroppar är normala globuliner förformade under syntesen. Immunglobuliner erhållna genom immunisering av olika djur med samma antigen och vid immunisering av samma djurart med olika antigen har olika egenskaper, precis som serumglobuliner av olika djurarter inte är samma.

Klasser av immunglobuliner

Immunoglobuliner produceras av immunkompetenta celler i lymfoida organ, de skiljer sig i molekylvikt, sedimentationskonstant, elektroforetisk mobilitet, kolhydratinnehåll och immunologisk aktivitet. Det finns fem klasser (eller typer) av immunglobuliner:

Immunoglobuliner M (IgM): molekylvikt på cirka 1 miljon, har en komplex molekyl; de första som dyker upp efter immunisering eller antigenstimulering, har en skadlig effekt på mikrober som kommer in i blodomloppet, bidrar till deras fagocytos; svagare än immunoglobuliner G, binder lösliga antigener, bakterietoxiner; förstörs i kroppen 6 gånger snabbare än immunoglobuliner G (till exempel hos råttor är halveringstiden för immunoglobulin M 18 timmar, och den för immunoglobulin G är 6 dagar).

Immunoglobuliner G (IgG): molekylvikt på cirka 160 000, de anses vara standard- eller klassiska antikroppar: de passerar enkelt genom morkakan; bildas långsammare än IgM; binder mest effektivt lösliga antigener, speciellt exotoxiner, såväl som virus.

Immunoglobuliner A (IgA): molekylvikter på cirka 160 000 eller mer, produceras av lymfvävnaden i slemhinnorna, hämmar nedbrytningen av enzymer i kroppens celler och motstår de patogena effekterna av tarmkim, penetrerar lätt kroppens cellbarriärer, finns i kolostrum, saliv, tårar och tarmslem, svett, separerad av näsan, i blodet är i mindre mängder, lätt anslutna till kroppens celler; IgA verkade tydligen i processen för att skydda slemhinnorna från aggressivitet av bakterier och för att överföra passiv immunitet till avkommor.

Immunoglobuliner E (IgE): molekylvikt av cirka 190 000 (enligt R. S. Nezlin, 1972); de är förmodligen allergiska antikroppar - de så kallade reagenserna (se nedan).

Immunoglobuliner D (IgD): molekylvikt av cirka 180 000 (enligt R. S. Nezlin, 1972); väldigt lite är känt om dem för närvarande.

Antikroppsstruktur

En immunoglobulinmolekyl består av två icke-identiska polypeptidsubenheter - lätta (L - från engelska lätta) kedjor med en molekylvikt av 20 000 och två tunga (H - från engelska tunga) kedjor med en molekylvikt av 60 000. Dessa kedjor, kopplade till disulfidbroar, bildar huvudmonomeren LH. Men i det fria tillståndet förekommer sådana monomerer inte. De flesta immunoglobulinmolekyler består av dimerer (LH)2, resten är från polymerer (LH)2n. De huvudsakliga N-terminala aminosyrorna i humant gamma-globulin är asparaginsyra och glutaminsyra, kanin - alanin och asparaginsyra. Porter (RR Porter, 1959), verkade på papainimmunoglobuliner, fann att de sönderdelas i två (I och II) Fab-fragment och ett Fc-fragment (III) med en sedimentationskonstant på 3,5S och en molekylvikt av cirka 50 000. kolhydrater kopplade till Fc-fragmentet. På förslag från WHO: s experter fastställdes följande nomenklatur av antikroppsfragment: Fab-fragment - monovalent, aktivt anslutande till antigenet; Fc-fragment - interagerar inte med antigenet och består av C-terminala halvor av de tunga kedjorna; Fd-fragment är ett tungt kedjesäte som är en del av Fab-fragmentet. Ett fragment av pepsinhydrolys av 5S föreslås beteckna F (ab)2, och det monovalenta 3,5S-fragmentet är Fab.

Antikroppspecificitet

En av de viktigaste egenskaperna hos antikroppar är deras specificitet, vilket uttrycks i det faktum att antikroppar mer aktivt och mer fullständigt interagerar med antigenet som kroppen stimulerades med. Antigen-antikroppskomplexet i detta fall har den största styrkan. Antikroppar kan skilja små förändringar i struktur i antigen. När man använder konjugerade antigener som består av ett protein och den inkluderade enkla kemiska substansen - hapten, är de resulterande antikropparna specifika för hapten, protein och protein-hapten-komplexet. Specificiteten beror på den kemiska strukturen och det rumsliga mönstret hos antideterminanterna hos antikropparna (aktiva centra, reaktiva grupper), det vill säga delarna av antikropparna genom vilka de ansluter till antigenens determinanter. Antalet antideterminanter för antikroppar kallas ofta deras valens. Så en IgM-antikroppsmolekyl kan ha upp till 10 valenser, IgG- och IgA-antikroppsmolekyler är tvåvärda.

Enligt Karash (F. Karush, 1962) består de aktiva centrumen av IgG av 10–20 aminosyrarester, vilket är ungefär 1% av alla aminosyror i antikroppsmolekylen, och enligt Winkler (M. N. Winkler, 1963) består de aktiva centren av från 3-4 aminosyrarester. Tyrosin, lysin, tryptofan och andra hittades i deras komposition. Antideterminanter finns uppenbarligen i de aminoterminala halvorna av Fab-fragment. Variabla segment av lätta och tunga kedjor deltar i bildandet av det aktiva centrumet, där det senare spelar huvudrollen. Kanske är den lätta kedjan endast delvis involverad i bildandet av det aktiva centrum eller stabiliserar strukturen hos tunga kedjor. Den mest kompletta antideterminanten skapas endast av en kombination av lätta och tunga kedjor. Ju fler matchande punkter det finns mellan antideterminanter för antikroppar och antigenens determinanter, desto högre är specificiteten. Olika specificitet beror på sekvensen av aminosyrarester i det aktiva mitten av antikroppar. Kodningen av en enorm mängd antikroppar efter deras specificitet är oklar. Porter möjliggör tre möjligheter till specificitet.

1. Bildningen av den stabila delen av immunoglobulinmolekylen kontrolleras av en gen och den variabla delen av tusentals gener. De syntetiserade peptidkedjorna kombineras till en immunoglobulinmolekyl under påverkan av en speciell cellulär faktor. Antigenet fungerar i detta fall som en faktor som utlöser syntesen av antikroppar.

2. Immunoglobulinmolekylen kodas av stabila och variabla gener. Under perioden för celldelning inträffar en rekombination av variabla gener som bestämmer deras mångfald och variationen hos delar av globulinmolekyler.

3. Genen som kodar för den variabla delen av immunoglobulinmolekylen skadas av ett specifikt enzym. Andra enzymer reparerar skador, men på grund av fel tillåter en annan sekvens av nukleotider inom en given gen. Detta beror på den olika aminosyrasekvensen i den variabla delen av immunoglobulinmolekylen. Det finns andra hypoteser, till exempel. Burnet (F. M. Burnet, 1971).

Antikropparnas heterogenitet (heterogenitet) manifesteras på många sätt. Som svar på administreringen av ett enda antigen bildas antikroppar som skiljer sig i affinitet för antigenet, antigena determinanter, molekylvikt, elektroforetisk mobilitet och N-terminala aminosyror. Gruppantikroppar mot olika mikrober orsakar korsreaktioner på olika typer och typer av salmonella, shigella, Escherichia, animaliska proteiner, polysackarider. De producerade antikropparna är heterogena i sin specificitet med avseende på ett homogent antigen eller en enda antigen determinant. Heterogenitet hos antikroppar noterades inte bara mot protein- och polysackaridantigener, utan också mot komplex, inklusive konjugerade, antigener och mot haptener. Det antas att heterogeniteten hos antikroppar bestäms av den kända mikroheterogeniteten hos antigen-determinanter. Heterogenitet kan orsakas av bildandet av antikroppar mot antigen-antikroppskomplexet, som observeras med upprepad immunisering, skillnaden i cellerna som utgör antikropparna, och även tillhörande av antikroppar till olika klasser av immunoglobuliner, som, liksom andra proteiner, har en komplex genetiskt kontrollerad antigenstruktur.

Typer av antikroppar

Kompletta antikroppar har minst två aktiva centra och, i kombination med antigener in vitro, orsakar synliga reaktioner: agglutination, utfällning, komplementbindning; neutralisera gifter, virus, opsonisera bakterier, orsaka ett visuellt fenomen av immunhäftning, immobilisering, kapselsvullnad, blodplättbelastning. Reaktionerna fortsätter i två faser: specifik (interaktion mellan en antikropp med ett antigen) och icke-specifikt (ett eller annat av ovanstående fenomen). Det är allmänt erkänt att olika serologiska reaktioner beror på en, inte många, antikroppar och beror på formuleringstekniken. Det finns termiska kompletta antikroppar som reagerar med antigenet vid t ° 37 ° och kall (kryofil), som visar en effekt vid t ° under 37 °. Det finns också antikroppar som reagerar med antigenet vid låg temperatur, och den synliga effekten manifesteras vid t ° 37 °; dessa är bifasiska, biotermala antikroppar, till vilka Donat - Landsteiner-hemolysiner tilldelas. Alla kända klasser av immunglobuliner innehåller kompletta antikroppar. Deras aktivitet och specificitet bestäms av titer, aviditet (se Aviditet) och antalet antideterminanter. IgM-antikroppar är mer aktiva än IgG-antikroppar vid hemolys- och agglutineringsreaktioner.

Ofullständiga antikroppar (icke-utfällande, blockerande, agglutinoider), liksom kompletta antikroppar, kan binda till motsvarande antigen, men reaktionen åtföljs inte av fenomenet utfällning, agglutination etc., synlig in vitro.

Ofullständiga antikroppar hittades hos människor 1944 mot Rh-antigenet, de hittades i virus-, rickettsial- och bakterieinfektioner med avseende på toxiner i olika patologiska tillstånd. Det finns några bevis på bivalens av ofullständiga antikroppar. Bakteriella ofullständiga antikroppar har skyddande egenskaper: antitoxiska, opsoniserande, bakteriologiska; samtidigt hittades ofullständiga antikroppar i ett antal autoimmuna processer - med blodsjukdomar, särskilt hemolytisk anemi.

Ofullständiga hetero-, iso- och autoantikroppar kan orsaka cellskador och spelar också en roll i förekomsten av läkemedelsinducerad leuko- och trombocytopeni

Antikroppar som vanligtvis finns i blodserum hos djur och människor i frånvaro av en klar infektion eller immunisering anses vara normala (naturliga). Ursprunget till normala antibakteriella antikroppar kan i synnerhet associeras med antigenstimulering av kroppens normala mikroflora. Dessa synpunkter är teoretiskt och experimentellt underbyggda av studier på djur gnotobionts och nyfödda i normala levnadsförhållanden. Frågan om funktionerna hos normala antikroppar är direkt relaterad till specificiteten av deras verkan. L. A. Zilber (1958) trodde att individuell resistens mot infektioner och dessutom "kroppens immunogen beredskap" bestäms av deras närvaro. De normala antikropparnas roll i blodbaktericid aktivitet i opsonisering under fagocytos visas. Många forskares arbete har visat att normala antikroppar huvudsakligen är makroglobuliner - IgM. Vissa forskare har hittat normala antikroppar i IgA- och IgG-klasserna av immunoglobuliner. De kan innehålla antingen ofullständiga eller kompletta antikroppar (normala antikroppar mot röda blodkroppar - se blodgrupper).

Antikroppssyntes

Antikroppssyntes fortsätter i två faser. Den första fasen är induktiv, latent (1-4 dagar), i vilken antikroppar och antikroppsbildande celler inte detekteras; den andra fasen är produktiv (börjar efter den induktiva fasen), antikroppar finns i plasmaceller och vätska som rinner från lymfoida organ. Efter den första fasen av antikroppsbildning, börjar en mycket snabb tillväxthastighet av antikroppar, ofta kan deras innehåll fördubblas var 8: e timme eller ännu snabbare. Den maximala koncentrationen av olika antikroppar i blodserumet efter en enda immunisering registreras den 5: e, 7: e, 10: e eller 15: e dagen; efter injektion av deponerade antigener - den 21-30 eller 45: e dagen. Sedan sjunker antikroppstitrar efter 1-3 månader eller mer kraftigt. Men ibland registreras en låg nivå av antikroppar efter immunisering i blodet under flera år. Det visade sig att primär immunisering med ett stort antal olika antigen åtföljs av uppkomsten av initialt tunga IgM (19S) antikroppar, sedan under en kort tidsperiod - IgM och IgG (7S) antikroppar och slutligen lätta 7S antikroppar enbart. Upprepad stimulering av den sensibiliserade organismen med ett antigen påskyndar bildandet av båda klasser av antikroppar, förkortar den latenta fasen av antikroppsbildning, syntestiden för 19S antikroppar och främjar den föredragna syntesen av 7S antikroppar. Ofta visas 19S-antikroppar inte alls.

Markerade skillnader mellan den induktiva och den produktiva fasen av antikroppsbildning bildas när man studerar deras känslighet för ett antal påverkningar, vilket är av grundläggande betydelse för att förstå arten av specifik profylax. Till exempel är det känt att exponering före immunisering försenar eller fullständigt hämmar bildning av antikroppar. Bestrålning i reproduktionsfasen av antikroppsbildning påverkar inte innehållet av antikroppar i blodet.

Isolering och rening av antikroppar

För att förbättra metoden för isolering och rening av antikroppar har immunosorbenter föreslagits. Metoden är baserad på omvandlingen av lösliga antigener till olöslig genom att fästa dem genom kovalenta bindningar till en olöslig bas från cellulosa, Sephadex eller en annan polymer. Metoden tillåter erhållande av mycket renade antikroppar i stora mängder. Processen för isolering av antikroppar med användning av immunosorbenter inkluderar tre steg:

1) extraktion av antikroppar från immunserum;

2) tvättning av immunosorbenten från icke-specifika proteiner;

3) klyvning av antikroppar från det tvättade immunosorbenten (vanligtvis med buffertlösningar med låga pH-värden). Förutom denna metod är andra metoder för rening av antikroppar också kända. De kan delas in i två grupper: specifika och icke-specifika. Den första är baserad på dissociation av antikroppar från komplexet av olösligt antigen - antikropp (fällning, agglutinat). Det utförs av olika ämnen; en utbredd metod för enzymatisk matsmältning av ett antigen eller flockningsgift - antitoxinamylas, trypsin, pepsin. Termisk eluering används också vid t ° 37–56 °.

Ospecifika metoder för antikroppsrening baseras på isolering av gammaglobuliner: gelelektrofores, kromatografi på jonbyteshartser, fraktionering genom gelfiltrering genom Sephadex. Fällningsmetoden med natriumsulfat eller ammonium är allmänt känd. Dessa metoder är tillämpliga i fall av höga koncentrationer av antikroppar i serumet, till exempel med hyperimmunisering..

Gelfiltrering genom Sephadex såväl som användning av jonbyteshartser möjliggör separering av antikroppar efter storleken på deras molekyler.

Användning av antikroppar

Antikroppar, speciellt gammaglobuliner, används för behandling och förebyggande av difteri, mässling, stivkrampa, gasgreen, miltbrand, leptospiros, mot stafylokocker, rabies, influensa och andra. Speciellt framställda och renade diagnostiska sera används vid serologisk identifiering av patogener (se patogener). Identifiering av mikrober). Det visade sig att pneumokocker, stafylokocker, salmonella, bakteriofager, etc., adsorberande motsvarande antikroppar, vidhäftar blodplättar, erytrocyter och andra främmande partiklar. Detta fenomen kallas immunhäftning. Det har visats att proteinreceptorer för blodplättar och röda blodkroppar, som förstörs av trypsin, papain och formalin, spelar en roll i mekanismen för detta fenomen. Immunhäftningsreaktionen är temperaturberoende. Det beaktas av vidhäftningen av ett corpuskulärt antigen eller genom hemagglutination på grund av ett lösligt antigen i närvaro av antikroppar och komplement. Reaktionen är mycket känslig och kan användas både för att bestämma komplement och mycket små (0,005-0,01 μg kväve) antikroppar. Immunadhesion förbättrar leukocyt fagocytos.

Moderna teorier om antikroppsbildning

Det finns instruktiva teorier om antikroppsbildning, enligt Krim är antigenet direkt eller indirekt involverat i bildandet av specifika immunglobuliner, och teorier som involverar bildandet av genetiskt redan existerande antikroppar mot alla möjliga antigener eller celler som syntetiserar dessa antikroppar. Dessa inkluderar selektionsteorier och repressionsteori - derepression, som möjliggör syntes av antikroppar av en cell. Teorier föreslås också som syftar till att förstå processerna för det immunologiska svaret på nivån för hela organismen, med hänsyn till interaktion mellan olika celler och allmänt accepterade idéer om proteinsyntes i kroppen..

Teorin om den direkta Gaurowitz-Pauling-matrisen reducerar till det faktum att antigenet, som kommer in i cellerna som producerar antikroppar, spelar rollen som en matris som påverkar bildandet av en immunoglobulinmolekyl från peptidkedjor, vars syntes fortsätter utan antigenens deltagande. Antigen "intervention" inträffar endast i den andra fasen av bildandet av proteinmolekylen - fasen för vridning av peptidkedjorna. Antigenet förändrar de terminala N-aminosyrorna i den framtida antikroppen (immunoglobulin eller dess individuella peptidkedjor) så att de blir komplementära till antigenets determinanter och lätt kommer i kontakt med det. Den sålunda bildade antikroppen klyvs från antigenet, kommer in i blodomloppet och det frisatta antigenet deltar i bildandet av nya antikroppsmolekyler. Denna teori har tagit upp ett antal allvarliga invändningar. Det kan inte förklara bildandet av immunologisk tolerans; det överlägsna antalet antikroppar som produceras av cellen per tidsenhet av antalet antigenmolekyler som många gånger är mindre i den; varaktigheten av antikroppsproduktionen i kroppen, beräknad under åren eller genom hela livet, jämfört med en betydligt kortare antigenretentionstid i celler, etc. Det bör också beaktas att celler i plasma- eller lymfoidserier som producerar antikroppar inte assimilerar antigenet, även om närvaron av ett nativt antigen eller dess fragment i antikroppssyntetiserande celler kan inte helt uteslutas. Nyligen föreslog Gaurowitz (F. Haurowitz, 1965) ett nytt koncept, enligt vilket antigenet inte bara förändrar den sekundära, utan också den primära strukturen för immunoglobulin.

Den indirekta matrixteorin Burnet - Fenner fick beröm 1949. Dess författare trodde att antigenmakromolekyler och troligtvis dess determinanter tränger igenom kärnorna i kärnceller och orsakar ärftliga förändringar i dem, vars resultat är bildandet av antikroppar mot detta antigen. En analogi är tillåten mellan den beskrivna processen och transduktion i bakterier. Den nya kvaliteten på bildandet av immunglobuliner som förvärvats av celler överförs till avkommor från celler i otaliga generationer. Frågan om antigenens roll i den beskrivna processen var emellertid kontroversiell..

Denna omständighet var anledningen till uppkomsten av teorin om naturligt urval av Erne (K. Jerne, 1955).

Teorin om naturligt urval Erne. Enligt denna teori är ett antigen inte en matris för syntes av antikroppar och orsakar inte genetiska förändringar i antikroppsproducerande celler. Dess roll reduceras till valet av befintliga "normala" antikroppar som spontant uppstår för olika antigener. Detta händer som om: antigenet, som har kommit in i kroppen, hittar motsvarande antikropp, kombinerar med det; det resulterande antigen-antikroppskomplexet absorberas av celler som producerar antikroppar, och det senare får ett incitament att producera antikroppar av denna typ.

Burnets klonala selektionsteori (F. Burnet) var en vidareutveckling av Ernes idé om selektion, men inte om antikroppar, utan av celler som producerar antikroppar. Burnet anser att som ett resultat av den allmänna processen för differentiering i de embryonala och postnatala perioderna bildas många kloner av lymfoida eller immunologiskt kompetenta celler från mesenkymala celler som kan reagera med olika antigener eller deras determinanter och producerar antikroppar - immunoglobuliner. Arten av lymfoidcells svar på ett antigen under de embryonala och postnatala perioderna är annorlunda. Embryot producerar antingen inte globuliner alls eller syntetiserar dem lite. Det antas emellertid att de cellkloner som kan reagera med antigena determinanter av sina egna proteiner reagerar med dem och förstörs som ett resultat av denna reaktion. Så celler som bildar anti-A-agglutininer hos personer med blodgrupp A och anti-B-agglutininer hos personer med blodgrupp B kommer sannolikt att dö. Om något antigen introduceras till embryot kommer det på liknande sätt att förstöra motsvarande cellklon, och den nyfödda under nästa liv kommer teoretiskt att vara tolerant mot detta antigen. Processen att förstöra alla kloner av celler till sina egna proteiner i embryot slutar vid tidpunkten för dess födelse eller utgång från ägget. Nu har den nyfödda bara sin egen, och han känner igen alla "främmande" som har kommit in i hans kropp. Burnet tillåter också bevarande av "förbjudna" kloner av celler som kan reagera med autoantigener av organ som under utveckling isolerades från celler som producerar antikroppar. Erkännande av "främmande" säkerställs av de återstående klonerna av mesenkymceller, på vars yta det finns motsvarande antideterminanter (receptorer, cellulära antikroppar), komplementära till bestämningarna av det "främmande" antigenet. Typen av receptorerna är genetiskt bestämd, det vill säga kodad på kromosomerna och införs inte i cellen tillsammans med antigenet. Närvaron av färdiga receptorer leder oundvikligen till reaktionen av denna klon av celler med detta antigen, vars konsekvens nu är två processer: bildning av specifika antikroppar - immunoglobuliner och multiplikation av celler i denna klon. Burnet medger att en mesenkymcell som har fått antigenstimulering, i ordning av mitos, ger upphov till en population av dotterceller. Om en sådan cell har sett sig i lymfkörtelns medulla, ger den upphov till bildandet av plasmaceller, när den sätter sig i lymffolliklarna - till lymfocyterna, i benmärgen - till eosinofiler. Dotterceller är benägna att somatiska irreversibla mutationer. Vid beräkning av hela organismen kan antalet muterande celler per dag vara 100 000 eller 10 miljoner, och därför kommer mutationer att ge cellkloner till antigen. Burnets teori väckte stort intresse bland forskare och ett stort antal verifieringsexperiment. Det viktigaste beviset för teorin var bevisen på närvaron av antikroppliknande immunoglobulinreceptorer på föregångarna till antikroppsproducerande celler (benmärgs-lymfocyter) och närvaron av en intercistronisk uteslutningsmekanism i antikroppsproducerande celler för antikroppar med olika specificiteter.

Teorin om förtryck och avtryck formulerades av L. Szilard 1960. Enligt denna teori kan varje cell som producerar en antikropp potentiellt syntetisera vilken antikropp som helst mot något antigen, men denna process hämmas av repressorn för det enzym som är involverat i syntesen av immunglobulin. I sin tur kan bildningen av en repressor hämmas av påverkan av antigen. Sylard anser att bildningen av antikroppar styrs av speciella icke-smältbara gener. Deras antal når 10 000 för varje enskild (haploid) uppsättning av kromosomer.

Lederberg (J. Lederberg) anser att det i de gener som ansvarar för syntesen av globuliner finns platser som kontrollerar bildandet av aktiva antikroppscentra. Normalt hämmas funktionen hos dessa platser, och därför finns det en syntes av normala globuliner. Under påverkan av antigenet, och eventuellt också under påverkan av vissa hormoner, desinficeras och stimuleras platserna för genen som är ansvarig för bildandet av aktiva antikroppscentra, och cellen börjar syntetisera immunglobuliner.

Enligt H. N. Zhukov-Verezhnikov (1972) var evolutionära prekursorer för antikroppar skyddande enzymer liknande de som förekom i bakterier med förvärvad antibiotikaresistens. Liksom antikroppar består enzymer av de aktiva (med avseende på underlaget) och passiva delar av molekylen. På grund av dess ekonomi har mekanismen för "ett enzym - ett substrat" ​​ersatts av mekanismen för "enstaka molekyler med en variabel del", det vill säga antikroppar med variabla aktiva centra. Information om bildning av antikroppar implementeras i "reservgen" -zonen eller i "redundanszon" på DNA. En sådan redundans kan tydligen lokaliseras i kärn- eller plasmid-DNA, som lagrar ”evolutionär information. som spelade rollen som en intern mekanism som "utarbetar" kontrollen av ärftlig variation. " Den här hypotesen innehåller en lärorik komponent, men är inte helt instruktiv..

P.F. Zdrodovsky tilldelar antigen rollen som en repressor för vissa gener som styr syntesen av komplementära antikroppar. Samtidigt irriterar antigen, som Zdrodovsky medger, i enlighet med Selyes teori, adenohypofys, vilket resulterar i produktion av tillväxthormon (STH) och adrenokortikotropa (ACTH) hormoner. STH stimulerar det plasmacytiska och antikroppsbildande svaret från lymfoida organ, som i sin tur stimuleras av ett antigen, och ACTH, som verkar på binjurebarken, får det att frisätta kortison. Detta senare i immunsystemet hämmar den plasmacytiska reaktionen av lymfoida organ och antikroppssyntes av celler. Alla dessa bestämmelser bekräftades experimentellt..

Effekten av hypofysen - binjurar systemet på antikroppsproduktion kan endast detekteras i en tidigare immuniserad kropp. Det är detta system som organiserar anamnestiska serologiska reaktioner som svar på införandet av olika icke-specifika stimuli i kroppen.

En djupgående studie av cellförändringar i processen med det immunologiska svaret och ackumuleringen av ett stort antal nya fakta bekräftade den position enligt vilken det immunologiska svaret utförs endast som ett resultat av samverkan mellan vissa celler. I enlighet med detta föreslås flera hypoteser..

1. Teorin om samarbete mellan två celler. Många fakta har samlats som indikerar att det immunologiska svaret i kroppen utförs under förhållandena för interaktion mellan olika typer av celler. Det finns bevis på att makrofager är de första som assimilerar och modifierar antigenet, men senare "instrueras" lymfoida celler i syntesen av antikroppar. Samtidigt har det visats att samarbete också inträffar mellan lymfocyter som tillhör olika subpopulationer: mellan T-lymfocyter (tymusberoende, anthenreaktiva, härrörande från tymuskörteln) och B-celler (tymusoberoende, föregångare till antikroppsbildande celler, benmärgslymfocyter).

2. Teorier om samverkan mellan tre celler. Enligt synpunkter från Roitt (I. Roitt) och andra (1969) fångas och behandlas antigenet av makrofager. Ett sådant antigen stimulerar antigen-reaktiva lymfocyter som genomgår transformation till blastoidceller, som ger försenad överkänslighet och förvandlas till långlivade celler i immunologiskt minne. Dessa celler ingår i samarbete med antikroppsbildande stamceller, som i sin tur differentierar sig genom att spridas till antikroppsproducerande celler. Enligt Richter (M. Richter, 1969) har de flesta antigen en svag affinitet för antikroppsbildande celler, därför är följande processinteraktion nödvändig för antikroppsproduktion: antigen + makrofag - bearbetat antigen + antigen-reaktiv cell - aktiverat antigen + föregångare för en antikroppsbildande cell - en antikropp. Vid hög antigenaffinitet kommer processen att se ut så här: antigen + föregångare för antikroppsbildande celler - antikroppar. Det antas att under förhållanden med upprepad stimulering med ett antigen kommer den senare direkt i kontakt med en antikroppsbildande cell eller en immunologisk minnecell. Denna position bekräftas av den större strålningsbeständigheten hos det upprepade immunologiska svaret än det primära, vilket förklaras av olika resistens hos cellerna som deltar i det immunologiska svaret. Postulering av behovet av samarbete med tre celler inom antikroppsgenes, R.V. Petrov (1969, 1970) anser att syntesen av antikroppar kommer att ske endast om stamcellen (föregångaren till den antikroppsbildande cellen) samtidigt tar emot det bearbetade antigenet från makrofagen och immunopoiesinduceraren från den antigenreaktiva cellen, bildas efter dess (antigen-reaktiva cell) stimulering av ett antigen. Om stamcellen endast kommer i kontakt med antigenet som bearbetas av makrofagen, skapas immunologisk tolerans (se Immunologisk tolerans). Om det är kontakt med stamcellen endast med den antigenreaktiva cellen, inträffar en syntes av icke-specifikt immunglobulin. Det antas att dessa mekanismer ligger till grund för inaktivering av osungna stamceller med lymfocyter, eftersom induceraren av immunopoiesis, som kommer in i den allogena stamcellen, är en antimetabolit för den (syngenceller är celler med ett identiskt genom, allogena celler är av samma typ, med en annan genetisk sammansättning).

Allergiska antikroppar

Allergiska antikroppar är specifika immunoglobuliner producerade genom verkan av allergener hos människor och djur. Detta avser antikroppar som cirkulerar i blodet vid allergiska reaktioner av en omedelbar typ. Det finns tre huvudtyper av allergiska antikroppar: hudkänslig eller reagens; blockering och hemagglutination. Biologiska, kemiska och fysisk-kemiska egenskaper hos allergiska antikroppar hos en person är speciella (tab.).

Dessa egenskaper skiljer sig kraftigt från egenskaperna för utfällande, komplementbindande antikroppar, agglutininer och andra som beskrivs i immunologi.

Reaginer används ofta för att beteckna homologa mänskliga hudkänsliga antikroppar. Detta är den viktigaste typen av allergiska humana antikroppar, vars huvudegenskap är förmågan att genomföra en passiv reaktion med ökad känslighet för en frisk mottagares hud (se Prausnitz-Kustner-reaktion). Reaginer har ett antal karakteristiska egenskaper som skiljer dem från relativt väl studerade immunantikroppar. Många frågor om reagensers egenskaper och deras immunologiska karaktär förblir emellertid olösta. I synnerhet är frågan om homogenitet eller heterogenitet hos reagens i betydelsen att de tillhör en specifik klass immunglobuliner är olöst..

Blockering av antikroppar förekommer hos patienter med pollinos i processen med specifik hyposensibiliserande terapi mot antigenet genom vilket hyposensibilisering utförs. Egenskaperna hos denna typ av antikroppar liknar egenskaperna för utfällande antikroppar..

Hemagglutinerande antikroppar förstås vanligen att beteckna humana och djur serumantikroppar som kan specifikt agglutinera röda blodkroppar kopplade till ett pollenallergen (indirekt eller passiv, hemagglutineringsreaktion). Bindningen av ytan av en erytrocyt till ett pollenallergen uppnås med olika metoder, till exempel med användning av tannin, formalin, två gånger diazotiserad bensidin. Hemagglutinerande antikroppar kan hittas hos personer med överkänslighet mot växtpollen, både före och efter specifik hyposensibiliserande behandling. Under denna terapi sker omvandlingen av negativa reaktioner till positiva eller en ökning av titrarna för hemagglutineringsreaktionen. Hemagglutinerande antikroppar har egenskapen att adsorberas ganska snabbt på röda blodkroppar behandlade med ett pollenallergen, särskilt några av dess fraktioner. Immunosorbenter avlägsnar hemagglutinerande antikroppar snabbare än reagens. Hemagglutinerande aktivitet är också i viss utsträckning associerad med hudkänsliga antikroppar, men rollen för hudkänsliga antikroppar i hemagglutination är uppenbarligen liten eftersom det inte finns något samband mellan hudkänsliga och hemagglutinerande antikroppar. Å andra sidan finns det en korrelation mellan hemagglutinerande och blockerande antikroppar både hos individer som är allergiska mot växtpollen och hos friska individer immuniserade med växtpollen. Dessa två typer av antikroppar har många liknande egenskaper. I processen med specifik hyposensibiliseringsterapi sker en ökning av nivån för både denna och en annan typ av antikropp. Hemagglutinerande antikroppar mot penicillin är inte identiska med hudkänsliga antikroppar. Den främsta orsaken till bildandet av hemagglutinerande antikroppar var penicillinbehandling. Uppenbarligen bör hemagglutinerande antikroppar tilldelas gruppen antikroppar som av flera författare kallas "antikroppsvittnen".

1962 föreslog Shelley (W. Shelley) ett speciellt diagnostiskt test baserat på den så kallade degranuleringen av basofila leukocyter av kaninblod under påverkan av en allergenreaktion med specifika antikroppar. Emellertid är arten av antikropparna som deltar i denna reaktion och deras förhållande till cirkulerande reagens inte väl förstått, även om det finns bevis för en korrelation mellan denna typ av antikropp med nivån av reagens hos patienter med pollinos.

Upprättandet av optimala förhållanden mellan allergen och testserum är praktiskt mycket viktigt, särskilt i studier med typer av allergener, information om vilken ännu inte finns i relevant litteratur.

Följande typer av antikroppar kan tillskrivas allergiska antikroppar från djur: 1) antikroppar vid experimentell anafylax; 2) antikroppar vid spontana allergiska sjukdomar hos djur; 3) antikroppar som spelar en roll i utvecklingen av Arthus-reaktionen (som fällning). Vid experimentell anafylaxi finns både allmänna och lokala, speciella typer av anafylaktiska antikroppar med egenskapen att passivt sensibilisera huden hos djur av samma art i djurens blod.

Det har visats att anafylaktisk sensibilisering av marsvin med ängspollenallergenpollen åtföljs av cirkulation av hudkänsliga antikroppar i blodet. Dessa hudkänsliga kroppar har förmågan att utföra homolog passiv hudkänslighet in vivo. Tillsammans med dessa homologa hudkänsliga antikroppar, i allmänhet sensibilisering av marsvin med allergener från ängspollen, cirkulerar antikroppar genom passiv hemagglutination med bis-diazotiserad bensidin i blodet. Hudsensibiliserande antikroppar som utför homolog passiv överföring och har en positiv korrelation med anafylaxi klassificeras som homologa anafylaktiska antikroppar eller homocytotropa antikroppar. Med uttrycket "anafylaktiska antikroppar" tillskriver författarna en ledande roll i anafylaxisreaktionen. Studier började dyka upp som bekräftar förekomsten av homocytotropa antikroppar mot proteinantigener och konjugat i olika typer av försöksdjur. Flera författare identifierar tre typer av antikroppar involverade i allergiska reaktioner av den omedelbara typen. Dessa är antikroppar associerade med en ny typ av immunglobulin (IgE) hos människor och liknande antikroppar hos apor, hundar, kaniner, råttor, möss. Den andra typen av antikroppar är antikroppar från marsvinstyp, som kan fixeras på mastceller och isologa vävnader. De skiljer sig åt i ett antal egenskaper, i synnerhet är de mer termostabila. Det antas att antikroppar av IgG-typ också kan vara en andra typ av anafylaktisk antikropp hos människor. Den tredje typen är antikroppar som sensibiliserar heterologa vävnader som tillhör exempelvis marsvin i klass γ2. Hos människor har endast IgG-antikroppar förmågan att sensibilisera marsvinhud.

I djursjukdomar beskrivs allergiska antikroppar till följd av spontana allergiska reaktioner. Dessa antikroppar är termolabila och har hudkänsliga egenskaper..

Ofullständiga antikroppar används inom det medicinska området när antigenerna i ett antal isoserologiska system (se blodtyper) fastställs för att fastställa blod som tillhör en viss person i fall av brott (mord, sexuella brott, trafikolyckor, kroppsskada, etc.), liksom undersökning av omtvistat faderskap och moderskap. Till skillnad från fullständiga antikroppar orsakar de inte agglutination av röda blodkroppar i en salt miljö. Bland dem skiljer man två typer av antikroppar. Den första av dem är agglutinoider. Dessa antikroppar kan få röda blodkroppar att hålla sig samman i ett protein eller en makromolekylär miljö. Den andra typen av antikropp är kryptagglutinoider, som reagerar i ett indirekt Coombs-test med antihammaglobulinserum.

För att arbeta med ofullständiga antikroppar har ett antal metoder föreslagits som är indelade i tre huvudgrupper.

1. Metoder för conglutination. Det noteras att ofullständiga antikroppar kan orsaka agglutination av röda blodkroppar i ett protein eller makromolekylärt medium. Som sådant medium, använd blodserum från grupp AB (som inte innehåller antikroppar), bovint albumin, dextran, biogel - speciellt renat gelatin, bringat till neutralt pH med en buffertlösning etc. (se Konglutination).

2. Enzymatiska metoder. Ofullständiga antikroppar kan agglutinera röda blodkroppar som tidigare har behandlats med vissa enzymer. För sådan bearbetning används trypsin, ficin, papain, extrakt från brödjäst, protelin, bromelin etc..

3. Coombs-test med antiglobulinserum (se Coombs-reaktion).

Ofullständiga antikroppar relaterade till agglutinoider kan utöva sin effekt i alla tre grupper av metoder. Antikroppar relaterade till kryptagglutinoider kan inte agglutinera röda blodkroppar inte bara i saltlösning utan också i ett makromolekylärt medium och blockerar dem också i det senare. Dessa antikroppar upptäcks endast i indirekt Coombs-test, med hjälp av vilka inte bara antikroppar relaterade till kryptagglutinoider upptäcks, utan också antikroppar som är agglutinoider.

Monoklonala antikroppar

Från ytterligare material, volym 29

Det klassiska sättet att producera antikroppar för diagnostiska och forskningsändamål är att immunisera djur med specifika antigener och sedan erhålla immunsera innehållande antikroppar med den önskade specificiteten. Denna metod har ett antal nackdelar, främst associerade med det faktum att immunsera inkluderar heterogena och heterogena populationer av antikroppar som skiljer sig åt i aktivitet, affinitet (affinitet för antigen) och biologisk effekt. Konventionella immunsera innehåller en blandning av antikroppar specifika både för ett givet antigen och för proteinmolekyler som kontaminerar det. Monoklonala antikroppar mottagna med kloner av hybridceller - hybridom representerar en ny typ av immunologiska reagens (se). Den tveksamma fördelen med monoklonala antikroppar är deras genetiskt förutbestämda standard, obegränsad reproducerbarhet, hög känslighet och specificitet. De första hybridomen isolerades i början av 70-talet av 1900-talet, men den verkliga utvecklingen av en effektiv teknik för att skapa monoklonala antikroppar är förknippad med studierna av Köhler och Milypteyn (G. Kohler, S. Milstein), vars resultat publicerades 1975-1976. Under det kommande decenniet vidareutvecklades en ny riktning inom cellteknik relaterad till produktion av monoklonala antikroppar..

Hybridom bildas genom fusion av lymfocyter från hyperimmuniserade djur med celler transplanterade av plasmacyter av olika ursprung. Hybridom ärver från en av föräldrarna förmågan att producera specifika immunglobuliner, och från den andra, förmågan att reproducera sig obegränsat. Klonade populationer av hybridceller kan producera genetiskt homogena immunoglobuliner av en given specificitet under lång tid - monoklonala antikroppar. De mest använda monoklonala antikropparna producerade av hybridom erhållna med användning av den unika muscellinjen MORS 21 (RE).

De oöverkomliga problemen med tekniken för monoklonala antikroppar inkluderar komplexiteten och komplexiteten för att erhålla stabila högproduktiva hybridkloner som producerar monospecifika immunoglobuliner; svårigheten att erhålla hybridom som producerar monoklonala antikroppar mot svaga antigener som inte kan inducera bildningen av stimulerade B-lymfocyter i tillräckliga mängder; avsaknaden av vissa egenskaper hos immunsera i monoklonala antikroppar, till exempel förmågan att bilda fällningar med komplex av andra antikroppar och antigener, på vilka många diagnostiska testsystem baseras; låg frekvens av fusion av lymfocyter som producerar antikroppar med myelomceller och begränsad stabilitet av hybridom i masskulturer; låg stabilitet under lagring och ökad känslighet hos monoklonala antikroppspreparat för förändringar i pH, inkuberingstemperatur, liksom för frysning, upptining och exponering för kemiska faktorer; svårigheten att få hybridom eller transplanterbara producenter av humana monoklonala antikroppar.

Nästan alla celler i en population av klonade hybridom producerar monoklonala antikroppar av samma klass och underklass av immunoglobuliner. Monoklonala antikroppar kan modifieras med hjälp av metoder för cellulär immunteknik. Så det är möjligt att erhålla "triomer" och "kvadromer" som producerar monoklonala antikroppar med dubbel förutbestämd specificitet, ändra produktionen av pentameriskt cytotoxiskt IgM till produktion av pentameriska icke-cytotoxiska IgM, monomera icke-cytotoxiskt IgM eller IgM med reducerad affinitet, och även växel (under bibehållande av antigen) IgM-sekretion till IgD-sekretion och IgGl-sekretion till IgG2a, IgG2b eller IgA-sekretion.

Musgenomet tillhandahåller syntes av över 1 * 107 olika antikroppsvarianter som specifikt interagerar med epitoperna (antigena determinanter) av protein-, kolhydrat- eller lipidantigener som finns i celler eller mikroorganismer. Bildningen av tusentals olika antikroppar mot ett antigen, som skiljer sig i specificitet och affinitet, är möjlig; till exempel inducerar immunisering med homogena humana celler upp till 50 000 olika antikroppar. Med hjälp av en hybrid kan du välja nästan alla varianter av monoklonala antikroppar som kan induceras till detta antigen i kroppen av ett försöksdjur.

Mångfalden av monoklonala antikroppar producerade mot samma protein (antigen) kräver bestämning av deras finare specificitet. Karakterisering och selektion av immunglobuliner med de erforderliga egenskaperna bland de många typerna av monoklonala antikroppar som interagerar med antigenet som undersöks förvandlas ofta till mer arbetsintensivt experimentellt arbete än att erhålla monoklonala antikroppar. Dessa studier inkluderar separering av uppsättningen antikroppar i grupper specifika för specifika epitoper följt av selektion i varje grupp av det bästa alternativet för affinitet, stabilitet och andra parametrar. För att bestämma epitopspecificiteten används metoden för konkurrerande enzymimmunoanalys ofta..

Det beräknas att en primär sekvens på 4 aminosyror (den vanliga storleken på en epitop) kan uppstå upp till 15 gånger i aminosyrasekvensen för en proteinmolekyl. Korsreaktioner med monoklonala antikroppar observeras dock med en mycket lägre frekvens än vad som kan förväntas från dessa beräkningar. Detta händer eftersom långt ifrån alla dessa ställen uttrycks på proteinmolekylens yta och känns igen av antikroppar. Dessutom detekterar monoklonala antikroppar aminosyrasekvenser endast i en specifik konformation. Man bör komma ihåg att aminosyrasekvensen i proteinmolekylen inte distribueras statistiskt, och antikroppsbindningsställen är mycket större än den minsta epitopen som innehåller 4 aminosyror..

Användningen av monoklonala antikroppar har öppnat tidigare otillgängliga möjligheter för att studera mekanismerna för den funktionella aktiviteten hos immunoglobuliner. För första gången med användning av monoklonala antikroppar var det möjligt att identifiera antigena skillnader i proteiner som tidigare var urskiljbara. Ny subtyp och stamskillnader mellan virus och bakterier fastställdes och nya cellulära antigener upptäcktes. Med användning av monoklonala antikroppar hittades antigena bindningar mellan strukturer, vars existens inte kunde bevisas på ett tillförlitligt sätt med användning av polyklonala (konventionella immun) sera. Användningen av monoklonala antikroppar gjorde det möjligt att identifiera konservativa antigena determinanter av virus och bakterier med bred gruppspecificitet, liksom stamspecifika epitoper med stor variation och variation..

Av grundläggande betydelse är detekteringen av antigena determinanter med användning av monoklonala antikroppar, som inducerar produktionen av skyddande och neutraliserande antikroppar mot infektionsmedel, vilket är viktigt för utvecklingen av terapeutiska och profylaktiska läkemedel. Interaktionen mellan monoklonala antikroppar med motsvarande epitoper kan leda till steriska (rumsliga) hinder för manifestation av den funktionella aktiviteten hos proteinmolekyler, samt till allosteriska förändringar som transformerar konformationen av den aktiva delen av molekylen och blockerar den biologiska aktiviteten hos proteinet.

Endast med hjälp av monoklonala antikroppar var det möjligt att studera mekanismerna för samverkande verkan av immunoglobuliner, ömsesidig potentiering eller ömsesidig hämning av antikroppar riktade mot olika epitoper av samma protein.

För produktion av massiva mängder monoklonala antikroppar används ofta tumörer av möss. Rena preparat av monoklonala antikroppar kan erhållas på serumfria medier i fermenterbara suspensionskulturer eller i dialyssystem, i mikroinkapslade kulturer och anordningar såsom kapillärkulturer. För att erhålla 1 g monoklonala antikroppar krävs ungefär 0,5 1 ascitisk vätska eller 30 1 odlingsvätska som inkuberas i fermentatorer med specifika hybridomceller. Under produktionsbetingelser produceras mycket stora mängder monoklonala antikroppar. Väsentliga kostnader för framställning av monoklonala antikroppar motiveras av den höga effektiviteten för proteingrening på immobiliserade monoklonala antikroppar, och proteingreningskoefficienten i ett enstegs affinitetskromatografiprocess når flera tusen. Monoklonal antikroppsbaserad affinitetskromatografi används för att rena tillväxthormon, insulin, interferoner, interleukiner producerade av bakterie-, jäst- eller eukaryota cellstammar modifierade genom gentekniska metoder.

Användningen av monoklonala antikroppar som en del av diagnostiska satser utvecklas snabbt. År 1984 rekommenderades cirka 60 diagnostiska testsystem framställda med monoklonala antikroppar för kliniska studier i USA. Den viktigaste platsen bland dem är upptagen av testsystem för tidig diagnos av graviditet, bestämning av blodnivåer av hormoner, vitaminer, läkemedel, laboratorieutveckling av andra infektionssjukdomar.

Kriterierna för val av monoklonala antikroppar för deras användning som diagnostiska reagens är formulerade. Dessa inkluderar hög affinitet för antigenet, vilket ger bindning vid en låg koncentration av antigen, såväl som effektiv konkurrens med antikroppar från värdorganismen som redan har bundit till antigenerna i testprovet; orientering mot det antigeniska stället, vanligtvis inte igenkänt av antikropparna i värdorganismen och därför inte maskerade av dessa antikroppar; orientering mot upprepade antigena determinanter av ytstrukturerna hos det diagnostiserade antigenet; polyvalens som ger högre IgM-aktivitet jämfört med IgG.

Monoklonala antikroppar kan användas som diagnostiska läkemedel för bestämning av hormoner och läkemedel, toxiska föreningar, markörer av maligna tumörer, för klassificering och räkning av leukocyter, mer exakt och snabb bestämning av blodgruppstillhörighet, för upptäckt av antigener från virus, bakterier, protoso, för diagnos av autoimmuna sjukdomar, detektion av autoantikroppar, reumatoidfaktorer, bestämning av klasser av immunglobuliner i blodserum.

Monoklonala antikroppar kan framgångsrikt differentiera yttestrukturerna i lymfocyter och med stor noggrannhet identifiera lymfocyters huvudsubpulationer och klassificera dem i familjer av humant leukemi och lymfomceller. Nya monoklonala antikroppsreagens underlättar bestämningen av B-lymfocyter och T-lymfocyter, underklasser av T-lymfocyter, vilket gör det till ett av de enkla stegen för att beräkna blodformeln. Med användning av monoklonala antikroppar kan en eller en annan subpopulation av lymfocyter selektivt avlägsnas, vilket stänger av motsvarande funktion hos det cellulära immunsystemet.

Metoder utvecklas för att detektera tumörer och deras metastaser i hela organismen genom att introducera radioaktiva isotoper märkta med monoklonala antikroppar specifika för tumörantigener. Förmågan hos monoklonala antikroppar märkta med radioaktiva isotoper att hitta unika antigena determinanter gör det möjligt att bestämma storleken och platsen för hjärtinfarkt. Detta tillvägagångssätt kan användas för att diagnostisera alla andra skador, inklusive infektiöst ursprung (inklusive parasit- och bakterieprocesser).

Typiskt innehåller monoklonala antikroppsbaserade diagnostiska produkter immunoglobuliner märkta med radioaktivt jod, peroxidas eller annat enzym som används i enzymimmunanalysreaktioner, såväl som fluorokromer, såsom fluoresceinisotiocyanat, som används i immunofluorescensmetoden. Den höga specificiteten hos monoklonala antikroppar är av särskilt värde när man skapar förbättrade diagnostiska produkter, ökar känsligheten och specificiteten för radioimmunologisk, enzymimmunanalys, immunfluorescensmetoder för serologisk analys, typ av antigener.

Den terapeutiska användningen av monoklonala antikroppar kan vara effektiv om det är nödvändigt att neutralisera toxiner av olika ursprung, såväl som antigeniska gifter, för att uppnå immunsuppression under organtransplantation, för att inducera komplementberoende cytolys av tumörceller, för att korrigera sammansättningen av T-lymfocyter och immunregulering, för att neutralisera bakterier som är resistenta mot bakterier antibiotika, passiv immunisering mot patogena virus.

Det huvudsakliga hinderet för den terapeutiska användningen av monoklonala antikroppar är möjligheten att utveckla ogynnsamma immunologiska reaktioner associerade med det heterologa ursprunget till monoklonala immunoglobuliner. För att övervinna detta är det nödvändigt att erhålla humana monoklonala antikroppar. Framgångsrika studier i denna riktning möjliggör användning av monoklonala antikroppar som vektorer för målinriktad leverans av kovalent bundna läkemedel.

Terapeutiska läkemedel utvecklas som är specifika för strikt definierade celler och vävnader och har riktad cytotoxicitet. Detta uppnås genom konjugering av mycket toxiska proteiner, t.ex. difteritoxin, med monoklonala antikroppar som känner igen målceller. Riktat av monoklonala antikroppar kan kemoterapeutiska medel selektivt förstöra tumörceller i kroppen som bär ett specifikt antigen. Monoklonala antikroppar kan också spela rollen som en vektor när de införlivas i ytostrukturerna i liposomer, vilket säkerställer leverans av betydande mängder läkemedel som finns i liposomer till organ eller målceller.

Den konsekventa användningen av monoklonala antikroppar kommer inte bara att öka informationsinnehållet i vanliga serologiska reaktioner, utan förbereder också uppkomsten av grundläggande nya metoder för att studera interaktionen mellan antigener och antikroppar.

Publikationer Om Hjärtrytmen

Conception Blood Group-kompatibilitet

Innan makarna måste planera en påfyllning i familjen måste makarna genomgå en omfattande undersökning, som i förväg gör det möjligt att identifiera kroniska sjukdomar och dolda infektioner som kräver behandling.

Vad man ska göra om ett kärl i ögat brister

Det mänskliga ögat täcks på utsidan med en tunn transparent vävnad - konjunktiva. Detta är slemhinnan där det finns många tunna blodkärl. Om kärlen utvidgas av någon anledning kan det uppstå rodnad i ögat, vilket märks från sidan.